Antinukleære antistoffer (ANA)

Antinukleære antistoffer er en del av den komplekse diagnostiske prosessen med systemiske bindevevssykdommer. Den komplekse mekanismen for dannelse av antinukleære antistoffer gjør tolkningen av resultatene vanskelig, og tilstedeværelsen eller fraværet av et bestemt antistoff indikerer ikke alltid en sykdomsprosess. Hva er typene antinukleære antistoffer? Når skal testen utføres?

Innholdsfortegnelse:

1. Antinukleære antistoffer - typer
2. Antinukleære antistoffer - dannelse og virkningsmekanisme
3. Antinukleære antistoffer - indikasjoner for studien
4. Antinukleære antistoffer - hva er testen?
5. Antinukleære antistoffer - hvordan tolker man resultatet?

Anti-nukleære antistoffer (ANA) er autoantistoffer rettet mot elementer i cellekjernen, for eksempel DNA og cytoplasma. De er et av de mest varierte og mest studerte antistoffene.

Antinukleære antistoffer - typer

• antistoffer mot ekstraherbare kjernefysiske antigener (anti-ENA):
• mot DNA-topoisomerase I (anti-Scl70)
• mot ribonukleoprotein (anti-RNP)
• mot Smith-antigen (anti-Sm)
• anti-Mi2 / Mi-2
• anti-Ro (SS-A)
• anti-La
• anti-Jo1
• anti-PM-Scl
• anti-Kn
• antistoffer mot det kjernefysiske poredannende proteinet gp-2010 (anti-gp-210)
• antistoffer mot naturlig dobbeltstrenget DNA (anti-dsDNA)
• antisentromere antistoffer (anti-ACA)

Antinukleære antistoffer - dannelse og virkningsmekanisme

Autoimmunitet er en unormal respons fra immunforsvaret mot eget vev, noe som resulterer i utseendet på autoimmune sykdommer.

Forskjellige mekanismer for autoimmunitet er beskrevet, hvorav den ene er frigjøring av antigener skjult fra immunsystemet, f.eks. Som et resultat av inflammatorisk vevsskade.

Deretter frigjøres elementer som finnes i cellekjernen, for eksempel DNA, RNA, histoner, som immunsystemet begynner å gjenkjenne som noe fremmed og produserer antikjerne antistoffer mot dem.

Antinukleære antistoffer - indikasjoner for studien

• mistanke om bindevevssykdommer:
• systemisk lupus erythematosus (tilstedeværelse av antistoffer hos 95-100% av pasientene; anti-dsDNA-antistoffer er en spesifikk sykdomsmarkør)
• medikamentindusert lupus (95-100% av pasientene)
• antifosfolipidsyndrom (40-50% av pasientene)
• systemisk sklerodermi (80-95% av pasientene, spesielt anti-Scl70 antistoffer)
• polymyositis og dermatomyositis (40-80% av pasientene, spesielt anti-Jo1 og anti-Mi2 antistoffer)
• Sjögrens syndrom (48-96% av pasientene, spesielt anti-Ro og anti-La antistoffer)
• revmatoid artritt (ca. 10% av pasientene)
• juvenil idiopatisk artritt (mindre enn 10% av pasientene)
• Raynauds syndrom (20-60% av pasientene)
• fibromyalgi (15-25% av pasientene)
• blandede bindevevssykdommer (95-100% av pasientene)
• vurdering av sykdomsaktivitet og overvåking av behandlingseffektivitet, f.eks. anti-dsDNA-antistoffer i systemisk lupus erythematosus
• korrelerer tilstedeværelsen av antistoffer med forekomsten av spesifikke symptomer på sykdommen, f.eks.Sjögrens syndrom og tilstedeværelsen av anti-Ro og anti-La antistoffer
• forutsi sykdommen i fremtiden

Antinukleære antistoffer - hva er testen?

Blod tatt fra albuebøyningen på tom mage brukes til å bestemme antinukleære antistoffer.

Metodene for å bestemme antistoffene er veldig forskjellige og avhenger av typen antinukleært antistoff som måles. Dette er hovedsakelig immunologiske metoder som:

• ELISA
• RIA
• indirekte immunfluorescens
• metode for dobbelt immundiffusjon
• western blot

I tilfelle antinukleære antistoffer brukes en to-trinns diagnose. Først utføres en screeningtest ved bruk av den indirekte immunfluorescensmetoden, som er preget av høy følsomhet.

Den indirekte immunfluorescensmetoden består i å immobilisere HEp-2-celler avledet fra humane epitelceller på et objektglass.

Celler av denne linjen har i cytoplasma og cellekjerneantigener som binder patologiske antistoffer fra pasientens blod.

Etter at pasientens serum er lagt til lysbildet, binder de antinukleære antistoffene seg med spesifikke antigener og er synlige under mikroskopet takket være spesielle fluorescerende markører.

Fordelen med indirekte immunfluorescens er muligheten for å differensiere typene antistoffer på grunnlag av typen belysning av det fluorescerende fargestoffet.

For eksempel indikerer gløding av kjernen av den homogene typen tilstedeværelsen av anti-dsDNA eller anti-ssDNA-antistoffer.

Et positivt screeningtestresultat må alltid bekreftes. For dette formål brukes veldig spesifikke immunologiske metoder, f.eks. Western blot. Etter å ha oppdaget tilstedeværelsen og identifikasjonen av typen antinukleært antistoff, bestemmes dens titer, dvs. den høyeste fortynning av serum hvor nærværet av antistoffer kan påvises.

Antinukleære antistoffer - hvordan tolker man resultatet?

Riktig titer av antinukleære antistoffer bør være under 1:40.

Hvis screeningtesten for antinukleære antistoffer er negativ og det ikke er noen kliniske symptomer som tyder på systemisk bindevevssykdom, bør diagnosen ikke utvides til å omfatte spesifikke antistoffer, for eksempel anti-dsDNA, anti-Sm.

Klinisk relevante titere hos voksne anses å være ≥ 1: 160, og hos barn ≥ 1:40.

Ved positive resultater foreslås det å tolke testresultatet slik:

• titer 1: 40-1: 80 - borderline-resultat (svakt positivt), i fravær av kliniske symptomer på bindevevssykdommer, anbefales det ikke å gjenta testen eller utføre en oppfølgingstest, fordi resultatene hos de fleste ikke endrer seg gjennom årene
• titer 1: 160-1: 640 - middels positivt resultat, i fravær av kliniske symptomer på bindevevssykdommer, anbefales det å gjenta testen etter 6 måneder
• titer ≥ 1: 1280 - høyt positivt resultat, i nærvær av kliniske symptomer på bindevevssykdommer, kreves ytterligere spesialistdiagnose for å diagnostisere sykdommen

Man bør huske på at serologisk testing for antinukleære antistoffer er en del av en kompleks diagnostisk prosess, og et positivt resultat må alltid tolkes i sammenheng med det kliniske bildet og tilstedeværelsen av de karakteristiske symptomene på sykdommen.

Antinukleære antistoffer med lave titre finnes hos 5% av den sunne befolkningen, og frekvensen øker med alderen.

I tillegg er deres tilstedeværelse funnet i fysiologiske og patofysiologiske tilstander der antinukleære antistoffer ikke har noen diagnostisk betydning:

• infeksjoner, for eksempel tuberkulose, syfilis, malaria
• leversykdom, for eksempel levercirrhose
• lungesykdommer f.eks. sarkoidose, asbestose
• kreft, for eksempel leukemi, lymfom, brystkreft, melanom
• hudsykdommer, for eksempel psoriasis, lichen planus
• etter organtransplantasjon, f.eks. hjertetransplantasjon, nyretransplantasjon
• bruk av medikamenter, f.eks. antiepileptika, hydralazin, litiumsalter,
• andre autoimmune sykdommer, f.eks. Hashimotos sykdom, Addisons sykdom, type I-diabetes
• graviditet (opptil 20% av gravide)

Verdt å vite ...

Etnisk variasjon karakteriserer fremveksten av forskjellige typer antinukleære antistoffer.

For eksempel er det mer sannsynlig at kaukasiske pasienter med systemisk sklerose har anti-ACA-antistoffer, og afroamerikanere og afroamerikanere har større sannsynlighet for å ha topoisomeraseaktive antistoffer.

Anbefalt artikkel:

ANA (Antinuclear Antibody) Diagnostic Test

Litteratur

1. Fischer K. et al. Autoantistoffer i revmatologisk praksis. Forum Reumatol. 2016, 2, 1, 39–50.
2. Interne sykdommer, redigert av Szczeklik A., Medycyna Praktyczna Kraków 2010
3. Laboratoriediagnostikk med elementer fra klinisk biokjemi. Håndbok for medisinstudenter redigert av Dembińska-Kieć A. og Naskalski J.W., Elsevier Urban & Partner Wydawnictwo Wrocław 2009, 3. utgave

Om forfatteren

Karolina Karabin, MD, PhD, molekylærbiolog, laboratoriediagnostiker, Cambridge Diagnostics Polska En biolog med spesialisering i mikrobiologi og en laboratoriediagnostiker med over 10 års erfaring i laboratoriearbeid. En utdannet ved School of Molecular Medicine og medlem av det polske samfunnet for human genetikk. Leder for forskningsstipend ved Laboratory of Molecular Diagnostics ved Institutt for hematologi, onkologi og indre sykdommer ved det medisinske universitetet i Warszawa. Hun forsvarte tittelen doktor i medisinsk vitenskap innen medisinsk biologi ved det første fakultet for medisin ved det medisinske universitetet i Warszawa. Forfatter av mange vitenskapelige og populærvitenskapelige arbeider innen laboratoriediagnostikk, molekylærbiologi og ernæring. På daglig basis, som spesialist innen laboratoriediagnostikk, driver han innholdsavdelingen ved Cambridge Diagnostics Polska og samarbeider med et team av dietetikere ved CD Dietary Clinic. Han deler sin praktiske kunnskap om diagnostikk og diettbehandling av sykdommer med spesialister på konferanser, treningsøkter og i magasiner og nettsteder. Hun er spesielt interessert i innflytelsen av moderne livsstil på molekylære prosesser i kroppen.

Les flere artikler av denne forfatteren